簡(jiǎn)單理解:
HRP利用過氧化氫(H?O?)作為“燃料”,去氧化切割特定的“底物”(AH?)。這個(gè)氧化過程會(huì)導(dǎo)致底物發(fā)生可檢測(cè)的變化,例如:
產(chǎn)生顏色(生色底物)
產(chǎn)生熒光(熒光底物)
產(chǎn)生光(化學(xué)發(fā)光底物)
蛋白質(zhì)印跡
用于檢測(cè)混合物中的特定蛋白質(zhì)。
原理:將蛋白質(zhì)通過電泳分離并轉(zhuǎn)移到膜上,用HRP標(biāo)記的抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合。
檢測(cè):加入化學(xué)發(fā)光底物(如ECL),HRP催化反應(yīng)產(chǎn)生光信號(hào),通過X光膠片或化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)捕捉信號(hào)。條帶的亮度反映了目標(biāo)蛋白的含量。
辣根過氧化物酶 的核心用途。
HRP本身不產(chǎn)生顏色或光,但它是一個(gè)極其的 “信號(hào)放大器” 。它的所有用途都基于一個(gè)核心原理:催化過氧化氫(H?O?)去氧化各種底物,從而產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)(顏色、光或熒光)。
以下是其核心和廣泛的用途,主要集中在生物化學(xué)、分子生物學(xué)和臨床診斷領(lǐng)域
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