碘化丙啶光譜特性?:
游離狀態(tài)大激發(fā)/發(fā)射波長:493/636 nm
與DNA結(jié)合后大激發(fā)/發(fā)射波長:535/617 nm
熒光增強(qiáng):結(jié)合核酸后熒光強(qiáng)度增強(qiáng)20–30倍
在瓊脂糖凝膠電泳中,PI可替代溴化乙錠(EB)作為DNA/RNA染色劑,在紫外光下呈現(xiàn)紅色熒光條帶。
在免疫熒光或組織切片中,PI常作為核復(fù)染劑(counterstain),與其他熒光標(biāo)記共同使用,幫助定位細(xì)胞核位置。
PI具有潛在毒性,可能引起皮膚刺激、呼吸道刺激,并被列為可能致突變物(GHS07/GHS08),操作時應(yīng)佩戴手套、護(hù)目鏡,在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。
碘化丙啶實驗干擾因素?:
PI也能與RNA結(jié)合,建議使用RNase處理以消除背景干擾
在生物膜研究中,細(xì)胞外DNA(eDNA)可能導(dǎo)致假陽性染色,需結(jié)合其他方法驗證
碘化丙啶是一種溴化乙啶的類似物,它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。盡管PI不能通過活細(xì)胞膜,但卻能穿過破損的細(xì)胞膜而對核染色。PI經(jīng)常被用來與Calcein-AM或者FDA等熒光化合物一起使用,能同時對活細(xì)胞和死細(xì)胞染色。