糖原含量試劑盒微量法說明書

微量法 100管/96樣    

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

產(chǎn)品名稱：糖原含量試劑盒微量法

貨號：LZ-S01234

規(guī)格 : 100管/96樣

測試方法:微量法

產(chǎn)品分類：糖代謝系列

發(fā)貨地 ：上海

測定意義：

糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖，是糖的主要的儲存形式之一，主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量，分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度，當血糖升高時可在肝臟合成糖原，血糖降低時，肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此，肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時，肌糖原不能直接分解成血糖，先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>

測定原理：

蒽酮法。利用強堿性提取液提取糖原，在強酸性條件下利用蒽酮顯色劑測定糖原含量。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、濃硫酸（不允許快遞）和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：0.1mg/mL 的葡萄糖標準液 10mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1 瓶， 4℃保存；

糖原提?。?/span>

1﹑細胞或細菌：收集 500~1000 萬細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；加入 0.75mL 提取液超聲波破碎細菌或細胞（功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；轉(zhuǎn)移至10mL 試管中，95℃水浴 20min（蓋緊，防止水分散失），隔 5min 振搖試管 1 次，使充分混勻；取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到 5ml，混勻，8000g 25℃離心 10min，取上清液待測。

2﹑組織：稱取 0.1~0.2g 樣品，加入 0.75ml 提取液充分勻漿；轉(zhuǎn)移至 10ml 試管中；95℃水浴 20min（蓋緊，防止水分散失），隔 5min 振搖試管 1 次，使充分混勻；待組織全部溶解后，取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到 5ml，混勻，8000g 25℃離心 10min，取上清液待測。

操作步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標本后和加結(jié)合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻是決定實驗成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

生化檢測試劑盒常見問題：

在使用生化檢測試劑盒時，可能會遇到一系列常見問題，這些問題主要涉及到試劑盒的使用、保存、有效期、樣本處理以及實驗操作等方面。以下是一些常見的問題及其解決方法：

一、?測定原理?：生化試劑盒通過化學反應或酶促反應測定樣本中物質(zhì)的含量或酶活性。常用的儀器包括分光光度計和酶標儀，它們的測定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水質(zhì)、動植物組織、血清、細胞細菌、食品等樣本均可進行測定?。

?二、選擇不同規(guī)格的試劑盒?：根據(jù)實驗的實際情況選擇合適的試劑盒。如果實驗室有酶標儀且具備檢測波長，可以選擇微量法試劑盒；如果有分光光度計及相應規(guī)格的比色皿，則可以選擇常量法或微量法試劑盒。建議購買前仔細閱讀說明書，確認自備的儀器和試劑是否符合要求?。

?三、保存方法?：收到試劑盒后，如果暫時不用，應按照外包裝上指示的溫度保存。拆開包裝后，應按照每個試劑的保存溫度進行保存，注意有些試劑忌反復凍融，有些粉劑溶解后性質(zhì)不穩(wěn)定?。

四、?有效期?：一般生化試劑盒的有效期為6個月，也有特殊貨號的有效期為1年。具體以實際收到貨物的標簽信息為準?1。

?五、樣本處理?：新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標的測定，但有些生理活性物質(zhì)容易降解，建議使用新鮮樣本測定。對于冷凍樣本，建議在-70℃或液氮中保存。樣本在不同溫度下的保存時間有所不同，例如4℃可保存一周，-20℃保存一個月，-80℃保存3個月?。

?六、土壤酶活性測定?：對于土壤酶活性的測定，建議將鮮土風干并過篩后取樣，以測定的重復性。若使用鮮土測定，需樣本的顆粒大小一致且水分含量相似?。

七、?預測定?：在進行正式測定前，建議選擇2-3個預期結(jié)果差別較大的樣本做預實驗。通過預測定可以全面反映樣品特點、試劑質(zhì)量、儀器設(shè)備穩(wěn)定性和操作規(guī)范性，確保正式測定結(jié)果真實可靠?。

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