線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶試劑盒紫外分光光度法說明書
紫外分光光度法 25管/24樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
商品屬性:
產(chǎn)品名稱:線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶試劑盒紫外分光光度法
貨號:LZ-S016-A
規(guī)格 : 25管/24樣
測試方法:紫外分光光度法
產(chǎn)品分類:輔酶Ⅰ系列
發(fā)貨地:上海
測定意義:
復(fù)合體Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又稱 NADH-CoQ 還原酶或 NADH 脫氫酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,是線粒體內(nèi)膜中大的蛋白復(fù)合物。該酶催化一對電子從NADH 傳遞給 CoQ,同時可使 O2還原生成 O2.-,是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生 O2.-的主要部位。測定該酶活性,不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)狀態(tài),而且可以反映活性氧(ROS)生成狀態(tài)。
測定原理:
復(fù)合體Ⅰ能夠催化 NADH 脫氫生成 NAD+,在 340nm 下測定 NADH 的氧化速率計(jì)算出該酶活性的大小。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:25mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑二:5mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑三:0.5 mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑四:25mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑五:1 mL×1 支,-20℃保存;
試劑六:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 2mL 蒸餾水;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
工作液的配制:臨用前將試劑五轉(zhuǎn)移到試劑四中混合溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
樣本的前處理:
組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
① 準(zhǔn)確稱取 0.1g 組織或收集 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞,加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
② 將勻漿 600g,4℃離心 5min。
③ 棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心 10min。
④ 上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測定從線粒體泄漏的復(fù)合體Ⅰ(此步可選做)。
⑤ 步驟④中的沉淀即為線粒體,加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10 秒,重復(fù) 30 次),用于復(fù)合體Ⅰ酶活性測定。
生化檢測試劑盒操作步驟:
一、?準(zhǔn)備工具和環(huán)境?:確保操作臺面干凈、整潔,這是進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)的步。
?二、?仔細(xì)閱讀說明書?:這是使用試劑盒的基礎(chǔ),說明書包含了所有必要的信息和操作指南。
三、樣本采集?:按照說明書的指導(dǎo),正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本,如血液、唾液或鼻涕等。杭州
?四、樣本混合?:將樣本與試劑小心混合,注意輕柔操作,避免產(chǎn)生泡沫,以確保檢測的準(zhǔn)確性。
?五、?等待反應(yīng)?:混合后,耐心等待試劑盒的反應(yīng),這個時間可以用來進(jìn)行其他活動,但不要著急,因?yàn)楹玫慕Y(jié)果值得等待。
六、結(jié)果判讀?:時間到后,仔細(xì)判讀結(jié)果。試劑盒通常會有明確的指示,告訴你如何根據(jù)顯示的線條或顏色來判斷結(jié)果。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)
CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶4(NOX4)ELISA試劑盒 ,英文名: NOX4 ELISA Kit
人低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA檢測試劑盒Humanlowdensitylproteieceptor,LDLRELISAKit 96T/48T
大鼠抑制素B(INH-B)試劑盒 Rat inhibin B,INH-B ELISA Kit
英文名稱HumanCCL22ELISAKit人CCL22規(guī)格:96T/48T
非蛋白封阻緩沖液100毫升
ELISAKitHD人組織蛋白去乙?;敢?guī)格:48T/96T
CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)
SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶試劑盒紫外分光光度法小鼠蛋白Z(PROZ)ELISA試劑盒 ,英文名: PROZ ELISA Kit
人前白蛋白(PA)ELISA檢測試劑盒Humanprealbumin,PAELISAKit 96T/48T
大鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS/NOS3)試劑盒 Rat Endothelial niic oxide syhase,eNOS/NOS3 ELISA Kit
英文名稱RatBradykinin(BK)ELISAKit大鼠緩激肽酶聯(lián)分析(BK)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
酵母菌SD-P/URA培養(yǎng)基100毫升
ELISAKit親環(huán)蛋白人肽酰脯酰異構(gòu)酶規(guī)格:48T/96T
陰溝腸桿菌分離瓊脂(ECIA)
3200元
產(chǎn)品名:陰溝腸桿菌分離瓊脂,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯生化管
3200元
產(chǎn)品名:乙酰胺肉湯生化管,培養(yǎng)基
胰酶細(xì)胞消化液(不含EDTA)
3200元
產(chǎn)品名:胰酶細(xì)胞消化液,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯
3200元
產(chǎn)品名:乙酰胺肉湯,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)
3200元
產(chǎn)品名:胰酪胨大豆羊血,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯
3200元
產(chǎn)品名:胰酪胨大豆多粘菌素,培養(yǎng)基
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基管
3200元
產(chǎn)品名:胰酪大豆胨液體,培養(yǎng)基
胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板(TSA)
3200元
產(chǎn)品名:胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基,培養(yǎng)基