NADPH細(xì)胞色素C還原酶（NCR）試劑盒可見分光光度法說明書

可見分光光度法 50管/48樣 

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

產(chǎn)品名稱：NADPH細(xì)胞色素C還原酶（NCR）試劑盒可見分光光度法

貨號：LZ-S01262-A

規(guī)格 : 50管/48樣

測試方法:可見分光光度法

產(chǎn)品分類：P452系列

發(fā)貨地：上海

測定意義：

細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶，藥物在動物體內(nèi)的I相反應(yīng)主要依賴細(xì)胞色素P450酶催化完成，許多藥物能誘導(dǎo)或抑制細(xì)胞色素P450的活性，從而引起藥物的療效降低、中毒和殘留發(fā)生率的增加。NADPH-細(xì)胞色素C還原酶作為P450酶系的一員，負(fù)責(zé)將氧化型P450轉(zhuǎn)變成還原型。

測定原理：

NADPH-細(xì)胞色素c還原酶催化氧化型細(xì)胞色素c生成還原型細(xì)胞色素c，后者在550nm處有特征吸收峰，通過測定還原型細(xì)胞色素c的增加速率，計(jì)算NADPH-細(xì)胞色素c還原酶活性。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備

可見分光光度計(jì)、普通離心機(jī)，低溫超速離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水和甘油。

試劑的組成和配制：

試劑一?粉劑×1 瓶，4℃保存?臨用前加 100mL 蒸餾水充分溶解?

試劑??液體×1 瓶，4℃保存?

試劑й?粉劑×1 瓶，-20℃保存?臨用前配制，加 2.6 mL 蒸餾水充分溶解，4℃保存?

試劑四?粉劑×1 瓶，4℃保存?臨用前配制，加 550 μL 蒸餾水充分溶解，4℃保存?

NAD+和 NADH 的提取：

1 血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（mL）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 酸性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。NADH 的提?。喊凑昭澹{）體積（mL）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 堿性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

2 組織中 NAD+和 NADH 的提取：NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g組織，加入 1mL 酸性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。NADH 的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g組織，加入 1mL 堿性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

3 細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提取：NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：酸性提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 酸性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。NADH 的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：堿性提取液體積（mL）500~1000：1的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 堿性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

操作步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

生化檢測試劑盒常見問題：

在使用生化檢測試劑盒時(shí)，可能會遇到一系列常見問題，這些問題主要涉及到試劑盒的使用、保存、有效期、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面。以下是一些常見的問題及其解決方法：

一、?測定原理?：生化試劑盒通過化學(xué)反應(yīng)或酶促反應(yīng)測定樣本中物質(zhì)的含量或酶活性。常用的儀器包括分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀，它們的測定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水質(zhì)、動植物組織、血清、細(xì)胞細(xì)菌、食品等樣本均可進(jìn)行測定?。

?二、選擇不同規(guī)格的試劑盒?：根據(jù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。如果實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀且具備檢測波長，可以選擇微量法試劑盒；如果有分光光度計(jì)及相應(yīng)規(guī)格的比色皿，則可以選擇常量法或微量法試劑盒。建議購買前仔細(xì)閱讀說明書，確認(rèn)自備的儀器和試劑是否符合要求?。

?三、保存方法?：收到試劑盒后，如果暫時(shí)不用，應(yīng)按照外包裝上指示的溫度保存。拆開包裝后，應(yīng)按照每個(gè)試劑的保存溫度進(jìn)行保存，注意有些試劑忌反復(fù)凍融，有些粉劑溶解后性質(zhì)不穩(wěn)定?。

四、?有效期?：一般生化試劑盒的有效期為6個(gè)月，也有特殊貨號的有效期為1年。具體以實(shí)際收到貨物的標(biāo)簽信息為準(zhǔn)?1。

?五、樣本處理?：新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標(biāo)的測定，但有些生理活性物質(zhì)容易降解，建議使用新鮮樣本測定。對于冷凍樣本，建議在-70℃或液氮中保存。樣本在不同溫度下的保存時(shí)間有所不同，例如4℃可保存一周，-20℃保存一個(gè)月，-80℃保存3個(gè)月?。

?六、土壤酶活性測定?：對于土壤酶活性的測定，建議將鮮土風(fēng)干并過篩后取樣，以測定的重復(fù)性。若使用鮮土測定，需樣本的顆粒大小一致且水分含量相似?。

七、?預(yù)測定?：在進(jìn)行正式測定前，建議選擇2-3個(gè)預(yù)期結(jié)果差別較大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。通過預(yù)測定可以全面反映樣品特點(diǎn)、試劑質(zhì)量、儀器設(shè)備穩(wěn)定性和操作規(guī)范性，確保正式測定結(jié)果真實(shí)可靠?。

公司正在出售的產(chǎn)品：

AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)

CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD34 Protein Rat 重組大鼠 CD34 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MAX重組人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠前白蛋白(PA)ELISA試劑盒 ，英文名： PA ELISA Kit

小鼠端粒酶(TE)ELISA檢測試劑盒Mousetelomerase,TEELISAKit 96T/48T

人分泌型球蛋白A(SIgA)試劑盒 Human secretory immunoglobulin A,SIgA ELISA Kit

RatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAKit大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CDK4蛋白共沉淀分析試劑盒5次

MouseMethemoglobin,MHBELISA試劑盒小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ACE2重組小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(擬南芥)

MAX重組人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CD59 Protein Human 重組人 CD59 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD34 Protein Rat 重組大鼠 CD34 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

NADPH細(xì)胞色素C還原酶（NCR）試劑盒可見分光光度法小鼠多肽YY(PYY)ELISA試劑盒 ，英文名： PYY ELISA Kit

大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA檢測試劑盒Ratglucocoicoidreceptor-α,GR-αELISAKit 96T/48T

人白介素1β(IL-1β)試劑盒 Human Ierleukin 1β ELISA Kit

英文名稱Mouselprotein-associatedphospholipaseA2ELISAKit小鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)規(guī)格：96T/48T

PH5-6顯色(CHLOROPHENOLRED)指示溶液50毫升

Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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  陰溝腸桿菌分離瓊脂(ECIA)

  3200元

  產(chǎn)品名：陰溝腸桿菌分離瓊脂,培養(yǎng)基

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  乙酰胺肉湯生化管

  3200元

  產(chǎn)品名：乙酰胺肉湯生化管,培養(yǎng)基

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  胰酶細(xì)胞消化液(不含EDTA)

  3200元

  產(chǎn)品名：胰酶細(xì)胞消化液,培養(yǎng)基

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  乙酰胺肉湯

  3200元

  產(chǎn)品名：乙酰胺肉湯,培養(yǎng)基

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  胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)

  3200元

  產(chǎn)品名：胰酪胨大豆羊血,培養(yǎng)基

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  胰酪胨大豆多粘菌素肉湯

  3200元

  產(chǎn)品名：胰酪胨大豆多粘菌素,培養(yǎng)基

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  胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基管

  3200元

  產(chǎn)品名：胰酪大豆胨液體,培養(yǎng)基

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  胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板(TSA)

  3200元

  產(chǎn)品名：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基,培養(yǎng)基