谷胱甘肽還原酶（GR）試劑盒微量法說明書

微量法 100管/96樣 

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

產(chǎn)品名稱：谷胱甘肽還原酶（GR）試劑盒微量法

貨號：LZ-S0127

規(guī)格 : 100管/96樣

測試方法:微量法

產(chǎn)品分類：輔酶Ⅱ系列

發(fā)貨地：上海

測定意義：

GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶，是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一（通常昆蟲中GR被TrxR取代）。GR催化NADPH還原GSSG生成GSH，有助于維持體內(nèi)GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應(yīng)中對活性氧清除起關(guān)鍵作用，此外GR還參與抗壞血酸－谷胱甘肽循環(huán)途徑。

測定原理：

GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH，同時(shí)NADPH脫氫生成NADP+；NADPH在340 nm有特征吸收峰，相反NADP+在該波長無吸收峰；通過測定340 nm吸光度下降速率來測定NADPH脫氫速率，從而計(jì)算GR活性。

自備儀器和用品：

低溫離心機(jī)、水浴鍋、移液器、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水

試劑的組成和配制：

試劑一：液體 120mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×2 支，-20℃保存。臨用前加入 1.2mL 蒸餾水，混勻。

試劑三：粉劑×2 支，-20℃保存。臨用前加入 0.6mL 蒸餾水，混勻

NAD+和 NADH 的提?。?/span>

1 血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提取：按照血清（漿）體積（mL）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 酸性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。NADH 的提?。喊凑昭澹{）體積（mL）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 堿性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

2 組織中 NAD+和 NADH 的提?。篘AD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g組織，加入 1mL 酸性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。NADH 的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g組織，加入 1mL 堿性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

3 細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提?。篘AD+的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：酸性提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 酸性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。NADH 的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：堿性提取液體積（mL）500~1000：1的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 堿性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

操作步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FoxP3 叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子(多肽抗原 0.5mgFoxP3 叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子(多肽抗原)

CLPS Protein Human 重組人 CLPS / Colipase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

REG1A重組大鼠 REG1A / PSPS 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

EPHA7 Protein Mouse 重組小鼠 EphA7 / EHK-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FABP2重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠溶血0脂酸受體3(LPAR3)ELISA試劑盒 ，英文名： LPAR3 ELISA Kit

豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA檢測試劑盒PorcineCoicosterone,COELISAKit 96T/48T

大鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)試劑盒 Rat ansthyretin,T ELISA Kit

英文名稱HumanIerleukin-1α,IL-1αELISAKit人白介素1α(IL-1α)規(guī)格：96T/48T

動(dòng)物源性食品山羊源試劑盒20次

RatVitaminB6,VB6ELISA試劑盒大鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

REG1A重組大鼠 REG1A / PSPS 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

FoxP3 叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子(多肽抗原 0.5mgFoxP3 叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子(多肽抗原)

FABP2重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CLPS Protein Human 重組人 CLPS / Colipase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EPHA7 Protein Mouse 重組小鼠 EphA7 / EHK-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

谷胱甘肽還原酶（GR）試劑盒微量法小鼠甘露糖受體C1(MRC1)ELISA試劑盒 ，英文名： MRC1 ELISA Kit

人甘肽/甘素(GAL)ELISA檢測試劑盒Humangalanin,GALELISAKit 96T/48T

大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒 Rat pigme epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit

英文名稱RatFIIELISAKit大鼠凝血因子II(FII)規(guī)格：96T/48T

活體細(xì)胞組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性原位熒光染色檢測試劑盒20次

ELISAKitCyclin-D1人細(xì)胞周期素D1規(guī)格：48T/96T

生化檢測試劑盒常見問題：

在使用生化檢測試劑盒時(shí)，可能會遇到一系列常見問題，這些問題主要涉及到試劑盒的使用、保存、有效期、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面。以下是一些常見的問題及其解決方法：

一、?測定原理?：生化試劑盒通過化學(xué)反應(yīng)或酶促反應(yīng)測定樣本中物質(zhì)的含量或酶活性。常用的儀器包括分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀，它們的測定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水質(zhì)、動(dòng)植物組織、血清、細(xì)胞細(xì)菌、食品等樣本均可進(jìn)行測定?。

?二、選擇不同規(guī)格的試劑盒?：根據(jù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。如果實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀且具備檢測波長，可以選擇微量法試劑盒；如果有分光光度計(jì)及相應(yīng)規(guī)格的比色皿，則可以選擇常量法或微量法試劑盒。建議購買前仔細(xì)閱讀說明書，確認(rèn)自備的儀器和試劑是否符合要求?。

?三、保存方法?：收到試劑盒后，如果暫時(shí)不用，應(yīng)按照外包裝上指示的溫度保存。拆開包裝后，應(yīng)按照每個(gè)試劑的保存溫度進(jìn)行保存，注意有些試劑忌反復(fù)凍融，有些粉劑溶解后性質(zhì)不穩(wěn)定?。

四、?有效期?：一般生化試劑盒的有效期為6個(gè)月，也有特殊貨號的有效期為1年。具體以實(shí)際收到貨物的標(biāo)簽信息為準(zhǔn)?1。

?五、樣本處理?：新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標(biāo)的測定，但有些生理活性物質(zhì)容易降解，建議使用新鮮樣本測定。對于冷凍樣本，建議在-70℃或液氮中保存。樣本在不同溫度下的保存時(shí)間有所不同，例如4℃可保存一周，-20℃保存一個(gè)月，-80℃保存3個(gè)月?。

?六、土壤酶活性測定?：對于土壤酶活性的測定，建議將鮮土風(fēng)干并過篩后取樣，以測定的重復(fù)性。若使用鮮土測定，需樣本的顆粒大小一致且水分含量相似?。

七、?預(yù)測定?：在進(jìn)行正式測定前，建議選擇2-3個(gè)預(yù)期結(jié)果差別較大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。通過預(yù)測定可以全面反映樣品特點(diǎn)、試劑質(zhì)量、儀器設(shè)備穩(wěn)定性和操作規(guī)范性，確保正式測定結(jié)果真實(shí)可靠?。

• 

  甲基檸檬酸合酶(MCS）試劑盒可見分光光度法

  780元

  產(chǎn)品名：甲基檸檬酸合酶,可見分光光度法,試劑盒

• 

  脂肪酸合成酶（FAS）試劑盒紫外分光光度法

  780元

  產(chǎn)品名：脂肪酸合成酶,紫外分光光度法,試劑盒

• 

  線粒體檸檬酸(MCA）含量試劑盒紫外分光光度法

  975元

  產(chǎn)品名：線粒體檸檬酸,紫外分光光度法,試劑盒

• 

  乙酰輔酶A試劑盒紫外分光光度法

  780元

  產(chǎn)品名：乙酰輔酶A試劑盒,紫外分光光度法,試劑盒

• 

  酰基轉(zhuǎn)移酶（AAT）試劑盒可見分光光度法

  1300元

  產(chǎn)品名：?；D(zhuǎn)移酶,可見分光光度法,試劑盒

• 

  可溶性淀粉合成酶(SSS）試劑盒紫外分光光度法

  1300元

  產(chǎn)品名：可溶性淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒

• 

  結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS）試劑盒紫外分光光度法

  1300元

  產(chǎn)品名：結(jié)合態(tài)淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒

• 

  NO含量試劑盒可見分光光度法

  200元

  產(chǎn)品名：NO含量,可見分光光度法,試劑盒